जर्नल ऑफ़ सेल साइंस एंड थेरेपी
खुला एक्सेस

अमूर्त

चूहों में मानव यूरोथेलियल कोशिकाओं के साथ बोए गए कोलेजन सेल वाहक की इन विवो बायोकम्पेटिबिलिटी परीक्षण

Lisa Daum, Sabine Maurer, Martin Vaegler and Karl-Dietrich Sievert

ऊतक-इंजीनियर, मैट्रिक्स-स्थिरीकृत ऑटोलॉगस यूरोथेलियम मूत्रमार्ग पुनर्निर्माण के लिए एक नया विकल्प है, खासकर उन रोगियों के लिए जिनके लिए अन्य ऑटोलॉगस ग्राफ्ट उपलब्ध नहीं हैं। यूरोथेलियल ऊतक की इन विट्रो इंजीनियरिंग में कोशिका वाहक के रूप में बायोमटेरियल की आवश्यकता होती है जो कोशिका-आधारित प्रत्यारोपण की स्थिरता को बढ़ाते हैं। इस अध्ययन का उद्देश्य मानव यूरोथेलियल कोशिकाओं (HUC) के लिए वाहक मैट्रिक्स के रूप में इसकी उपयुक्तता के लिए एक नए अत्यधिक मानकीकृत, औद्योगिक रूप से निर्मित गोजातीय कोलेजन प्रकार I-आधारित सेल वाहक (CCC) की जांच करना था। इन विवो बायोकम्पेटिबिलिटी टेस्ट के रूप में इन प्रत्यारोपणों के व्यवहार और गिरावट को एक नग्न चूहे के मॉडल में साबित किया जाना था। ऊतक बायोप्सी से विस्तारित HUC का इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री द्वारा फेनोटाइपिक रूप से विश्लेषण किया गया और CCC पर बोया गया। इन विवो अनुप्रयोग के लिए, CCC को उच्च घनत्व में PKH26-लेबल वाले HUC के साथ बोया गया और नग्न चूहों की रेक्टस एब्डोमिनिस मांसपेशी पर संरचनाओं को प्रत्यारोपित किया गया। 1, 2, और 4 सप्ताह के बाद यूरोथेलियम-मैट्रिक्स-इम्प्लांट्स के एकीकरण, कोशिका अस्तित्व और गिरावट का अध्ययन किया गया। मल्टीलेयर्ड यूरोथेलियम-मैट्रिक्स-कंस्ट्रक्ट्स का इम्यूनोहिस्टोलॉजिकल लक्षण वर्णन AE1/AE3 और p63 (एपिथेलियल फेनोटाइप), CK20 (भेदभाव), और E-कैडेरिन और ZO-1 (जंक्शन गठन) के लिए किया गया था। इम्यूनोसाइटोकेमिकल धुंधलापन ने अलग-अलग कोशिकाओं के यूरोथेलियल चरित्र और फाइब्रोब्लास्ट और मांसपेशी कोशिकाओं की अनुपस्थिति को दिखाया। बारह नग्न चूहों में, यूरोथेलियम-मैट्रिक्स-इम्प्लांट्स मेजबान ऊतक में अच्छी तरह से एकीकृत हो गए, जहाँ कोई सूजन नहीं देखी गई। इम्यूनोफ्लोरेसेंस विश्लेषण ने उपकला फेनोटाइप, पालन और तंग जंक्शन गठन की पुष्टि की, स्तरीकृत HUC संस्कृतियों के साथ-साथ यूरोथेलियल फेनोटाइप और भेदभाव के सजातीय मल्टीलेयर गठन इन विट्रो CCC-मैट्रिक्स ने अतिरिक्त रूप से एक नग्न चूहे मॉडल में जांच की गई आशाजनक जैव-संगतता का खुलासा किया। इस प्रकार, यह अध्ययन यूरोथेलियल कोशिकाओं के लिए मैट्रिक्स के रूप में सीसीसी की उत्कृष्ट उपयुक्तता को प्रदर्शित करता है और नैदानिक ​​अनुप्रयोग के संबंध में बड़े पशु मॉडल में इसके उपयोग की सिफारिश करता है।