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नमूना तैयार करने की कार्य-प्रणाली को समझना: LC-MS/MS का उपयोग करके पता लगाने के लिए सीरम टेस्टोस्टेरोन की अर्ध-स्वचालित तैयारी

रमीसा फरिहा, कॉलिन हिल, मोहननाद जबराह, एडम स्पूनर, अनुभव त्रिपाठी*

उच्च प्रदर्शन वाली लिक्विड क्रोमैटोग्राफी-टेंडेम मास स्पेक्ट्रोमेट्री विभिन्न चयापचय विकारों की प्रगति का पता लगाने और निगरानी करने में हाल की नैदानिक ​​प्रगति के लिए महत्वपूर्ण रही है। इस तरह की प्रणालियों का उपयोग रोगियों में सीरम टेस्टोस्टेरोन के स्तर की नियमित निगरानी करने के लिए किया जाता है, ताकि विभिन्न दवाओं के दुष्प्रभावों को कम किया जा सके, साथ ही एंड्रोजन से जुड़े विकारों का निदान किया जा सके। वर्तमान अध्ययन केवल (100 μL) नमूना मात्रा से कुल सीरम टेस्टोस्टेरोन का पता लगाने के लिए एक LC-MS/MS-आधारित परख विकसित और मान्य करता है। रोगी के नमूनों पर नैदानिक ​​उपयोग के लिए विकसित डायग्नोस्टिक किट की उच्च थ्रूपुट क्षमता को बढ़ाने के लिए, प्रस्तावित विधि को JANUS ^{® G3 वर्कस्टेशन लिक्विड हैंडलर पर अर्ध-स्वचालन} के माध्यम से सुव्यवस्थित किया गया था । प्रस्तावित डायग्नोस्टिक किट ने टेस्टोस्टेरोन सीरम सांद्रता (5-1500 ng/dl) की नैदानिक ​​रूप से प्रासंगिक सीमा के भीतर उच्च पहचान परिशुद्धता (CV<5%) के साथ-साथ नमूना सटीकता (93%-108%) का प्रदर्शन किया। इसके अलावा, परख ने 5 एनजी/डीएल का एलओडी प्रदर्शित किया, जो व्यावसायिक रूप से स्थापित नैदानिक ​​उपकरणों के साथ काफी हद तक तुलनीय है। विकसित विधि ने निर्दिष्ट टेस्टोस्टेरोन सीरम रेंज पर उच्च रैखिकता भी प्रदर्शित की, जिसमें मैनुअल और स्वचालित नमूना तैयारी दोनों का उपयोग करके R2>0.99 की प्राप्त रैखिकता थी। कुल मिलाकर, दिखाया गया कार्य नैदानिक ​​और अनुसंधान उपयोग के लिए सीरम में रोगी टेस्टोस्टेरोन के स्तर के नियमित मूल्यांकन के लिए एक अनुकूलित, स्वचालित एलसी-एमएस/एमएस आधारित टेस्टोस्टेरोन डायग्नोस्टिक परख प्रस्तुत करता है।