क्लिनिकल और प्रायोगिक नेत्र विज्ञान जर्नल
खुला एक्सेस
आईएसएसएन: 2155-9570
आईएसएसएन: 2155-9570
जैकलिन वाई बरमूडेज़, हन्ना सी वेबर, गौरांग सी पटेल, लियांग-जून यान, एबॉट एफ क्लार्क और वेइमिंग माओ
पृष्ठभूमि: प्राथमिक-खुले कोण ग्लूकोमा (POAG) के लिए प्राथमिक जोखिम कारक इंट्राओकुलर दबाव (IOP) में वृद्धि है। POAG रोगियों में, ट्रेबिकुलर मेशवर्क (TM) के माध्यम से बहिर्वाह प्रतिरोध असामान्य रूप से ऊंचा होता है। TM में ग्लूकोमा से जुड़े महत्वपूर्ण रोग परिवर्तनों में से एक अत्यधिक क्रॉस-लिंक्ड एक्टिन नेटवर्क (CLANs) का गठन है। CLANs वेब जैसी बहुभुज संरचनाएं हैं जो कंफ्लुएंट ग्लूकोमा TM कोशिकाओं और ऊतकों में पाई जाती हैं। ग्लूकोमा से जुड़े कारक ग्रोथ फैक्टर बीटा 2 (TGFβ2) और ग्लूकोकोर्टिकोइड्स को गैर-ग्लूकोमा TM कोशिकाओं (NTM) में CLAN गठन को प्रेरित करते हैं। CLANs कोशिका कठोरता को बढ़ा सकते हैं और होमियोस्टेसिस को बदल सकते हैं, और इस तरह IOP को बढ़ा सकते हैं।
विधियाँ: हमने CLAN-संबंधित प्रोटीन की पहचान करने के लिए प्रोटिओमिक दृष्टिकोण का उपयोग किया। हमने CLANs को प्रेरित करने के लिए 7 दिनों के लिए 0.1% इथेनॉल (EtOH; वाहन), 100 nM डेक्सामेथासोन (DEX), या 5 ng/ml TGFβ2 प्लस 0.1% EtOH के साथ संलयित प्राथमिक NTM कोशिकाओं का उपचार किया। साइटोस्केलेटन युक्त ट्राइटन अघुलनशील अंश को दो-आयामी विभेदक इन-जेल वैद्युतकणसंचलन (2D-DIGE) के लिए निकाला गया था। 2D-जैल में विभेदक व्यक्त प्रोटीन की पहचान करने के लिए मास स्पेक्ट्रोमेट्री (MS) का उपयोग किया गया था । पहचाने गए प्रोटीन के CLANs के साथ सह-स्थानीयकरण की पुष्टि इम्यूनोसाइटोफ्लोरेसेंस (ICF) माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके की गई थी।
परिणाम: 2D-DIGE ने दोनों उपचार समूहों में 103 अलग-अलग व्यक्त प्रोटीन का खुलासा किया। MS ने 23 सबसे समृद्ध प्रोटीन की पहचान की। ICF ने दिखाया कि कैलडेसमोन, कैलपोनिन, मायोसिन लाइट चेन और ट्रोपोमायोसिन CLANs के साथ सह-स्थानीयकृत थे।
निष्कर्ष: हमने NTM कोशिकाओं में DEX या TGFβ2- प्रेरित CLAN गठन के साथ अलग-अलग तरीके से व्यक्त प्रोटीन के एक उपसमूह की पहचान की। CLAN गठन और/या रखरखाव में इन प्रोटीनों की संभावित भागीदारी के लिए आगे की जांच की आवश्यकता है। ये प्रोटीन ग्लूकोमा के रोगजनन में नई अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते हैं।