जर्नल ऑफ़ सेल साइंस एंड थेरेपी
खुला एक्सेस

अमूर्त

ऑटोलॉगस जेल्सोलिन एक्सोजेनस न्यूक्लियोटाइड्स के साथ मिलकर इक्विन एडीपोज़ व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्ट्रोमल कोशिकाओं में चोंड्रोजेनिक विभेदन को बढ़ाता है - एक इन विट्रो शोध

क्रिज़िस्तोफ़ मैरीज़, मोनिका मारेडज़ियाक, एग्निज़्का स्मिसज़ेक, जैकब ग्रेज़ेसियाक और अन्ना सिउडज़िंस्का

पृष्ठभूमि: आजकल, पशु चिकित्सा पद्धति में, मेसेनकाइमल स्ट्रोमल कोशिकाओं के अनुप्रयोग पर आधारित उन्नत चिकित्सा का उपयोग करके उपास्थि अध:पतन से जुड़े विकारों का उपचार शामिल है। प्रत्यारोपण के लिए कोशिकाओं की तैयारी के लिए इन विट्रो कल्चर और उनकी चोंड्रोजेनिक क्षमता के मूल्यांकन की आवश्यकता होती है।

उद्देश्य : यह निर्धारित करना कि क्या अश्व सीरम और बहिर्जात न्यूक्लियोटाइड से व्युत्पन्न ऑटोलॉगस जेल्सोलिन, अश्व वसा व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्ट्रोमल कोशिकाओं (EqASCs) की चयापचय गतिविधि और चोंड्रोजेनिक विभेदन को बढ़ा सकता है।

विधियाँ: मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं को घोड़े के चमड़े के नीचे के वसा ऊतक से अलग किया गया। मानक वृद्धि माध्यम को 1% जेल्सोलिन या/और 0.1 मिलीग्राम/एमएल न्यूक्लियोटाइड के साथ पूरक किया गया था। कोशिकाओं की प्रसार गतिविधि को साइटोटॉक्सिक परख और माइक्रोवेसिकल्स शेडिंग के विश्लेषण के साथ प्राप्त परिणामों के आधार पर निर्धारित किया गया था। प्रकाश, फ्लोरोसेंट और स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके आकृति विज्ञान, साइटोफिजियोलॉजिकल गतिविधि और चोंड्रोजेनिक विभेदन क्षमता का मूल्यांकन किया गया। चोंड्रोजेनिक उत्तेजना के प्रभावों को (i) साइटोस्केलेटन और मैट्रिक्स प्रोटीन के लिए जीन अभिव्यक्ति के विश्लेषण; (ii) प्रोटियोग्लाइकन हिस्टोकेमिस्ट्री और (iii) संस्कृति विकास पैटर्न और चोंड्रो-नोड्यूल गठन के विश्लेषण के माध्यम से निर्धारित किया गया था।

परिणाम: बहिर्जात न्यूक्लियोटाइड से प्रेरित संस्कृतियों में प्रसार गतिविधि में वृद्धि देखी गई। हालांकि जेल्सोलिन के योग ने EqASCs प्रसार को प्रभावित नहीं किया, लेकिन इसने साइटोस्केलेटन अखंडता में योगदान दिया। दोनों ने चोंड्रोजेनिक विभेदन पर सकारात्मक रूप से प्रभावित होने वाले कारकों की जांच की - जेल्सोलिन साइटोस्केलेटन प्रोटीन अभिव्यक्ति के स्थिरीकरण के माध्यम से, जबकि न्यूक्लियोटाइड नोड्यूल गठन को बढ़ावा देकर। जेल्सोलिन और न्यूक्लियोटाइड के संयोजन ने कोशिकाओं के प्रसार को बढ़ाया, जो उच्च सेलुलर गतिविधि और माइक्रोवेसिकल्स शेडिंग द्वारा परिलक्षित होता था और चोंड्रो नोड्यूल गठन पर प्रभाव डालता था।

निष्कर्ष: वसा ऊतकों से पृथक मेसेनकाइमल स्ट्रोमल स्टेम कोशिकाओं के इन विट्रो संवर्धन में क्रियान्वित ऑटोलॉगस जेल्सोलिन और बहिर्जात न्यूक्लियोटाइड्स उन कोशिकाओं की कोशिकीय अखंडता, प्रसार और कांड्रोजेनिक विभेदन को बढ़ा सकते हैं, इस प्रकार यह सीधे तौर पर अश्वारोही ऑस्टियोआर्थराइटिस उपचार के लिए प्रयुक्त वसा व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्ट्रोमल स्टेम कोशिकाओं के प्रत्यारोपण की पुनर्योजी क्षमता को प्रभावित कर सकते हैं।