जर्नल ऑफ़ सेल साइंस एंड थेरेपी
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OCT-3/4 और KLF-4 का TATκ फ्यूजन प्रोटीन: स्थिर मिश्रित जनसंख्या कोशिका रेखाएँ जो लक्ष्य कोशिकाओं तक फ्यूजन प्रोटीन पहुँचाने में सक्षम हैं

फ़ज़लिना नॉर्डिन, जी जून टाई, जोप गाकेन और फ़रज़िन फ़रज़ानेह

तेजी से बढ़ते साक्ष्यों ने दिखाया है कि Oct-3/4, KLF4, Sox2 और c-Myc सहित जीनों के एक छोटे पैनल की जबरन अभिव्यक्ति, पहले से विभेदित कोशिकाओं के पुनर्प्रोग्रामिंग को प्रेरित कर सकती है, जिससे प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (iPSCs) उत्पन्न होते हैं। हालाँकि, आनुवंशिक संशोधनों द्वारा iPSCs की पीढ़ी घातक परिवर्तन के जोखिम को बढ़ाती है। इसलिए, अपरिवर्तनीय आनुवंशिक संशोधन के बिना विभेदित कोशिकाओं की कुशल इन विट्रो पुनर्प्रोग्रामिंग अत्यधिक वांछनीय है। ट्रांसक्रिप्शन कप्पा (TATκ) का बेहतर ट्रांस-एक्टिवेटर, एक सिंथेटिक TAT-HIV, कई प्रोटीन को लक्ष्य कोशिकाओं में पहुँचाने की क्षमता प्रदान करता है, इस प्रकार, यह ट्रांसक्रिप्शन कारकों या चिकित्सीय एजेंटों के लिए एक संभावित वैकल्पिक वितरण तंत्र बनाता है। ग्रीन फ्लोरोसेंस प्रोटीन (GFP) और एपोप्टिन को मॉडल प्रोटीन के रूप में उपयोग करते हुए, हमने हाल ही में सेल लाइनों को उत्पन्न करने की रणनीति का वर्णन किया है जो लक्ष्य कोशिकाओं द्वारा बाद में प्रोटीन ट्रांसडक्शन मध्यस्थता के लिए संशोधित HIV-TAT प्रोटीन ट्रांसडक्शन डोमेन (PTD) ले जाने वाले प्रोटीन को स्रावित करते हैं। इस रणनीति का उपयोग करके हमने TATκ के साथ संलयन में बहुसंभावित कारक Oct-3/4 या KLF4 स्रावित करने वाली 293T कोशिकाएँ उत्पन्न की हैं। ट्रांसड्यूस्ड 293T सेल के कल्चर माध्यम में Oct-3/4 और KLF4 का पता लगाया गया और हेमटोपोइएटिक सेल लाइनों JURKAT और FDCP-1 द्वारा Oct-3/4 के अपटेक की पुष्टि वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण द्वारा की गई। KLF4 उत्पादक 293T सेल के कल्चर माध्यम में मौजूद था, लेकिन हम अभी भी लक्ष्य कोशिकाओं द्वारा अपटेक को प्रदर्शित करने में असमर्थ हैं। प्राप्त परिणामों के आधार पर, हम आशा करते हैं कि ये स्थिर मिश्रित जनसंख्या कोशिका रेखाएँ चिकित्सीय उद्देश्यों के लिए iPSCs के निर्माण में महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकती हैं।