क्लिनिकल और सेलुलर इम्यूनोलॉजी जर्नल
खुला एक्सेस

अमूर्त

STAT1 को T/C28a2 अमरकृत किशोर मानव कोन्ड्रोसाइट लाइन में संवैधानिक रूप से सक्रिय किया जाता है और IL-6 प्लस घुलनशील IL-6R द्वारा उत्तेजित किया जाता है

इवान सी मेस्ज़ारोस और चार्ल्स जे मालेमुड

T/C28a2 अमरकृत किशोर मानव चोंड्रोसाइट्स का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया गया था कि सिग्नल ट्रांसड्यूसर और ट्रांसक्रिप्शन-1 के एक्टिवेटर (STAT1) की सक्रियता किस हद तक पुनः संयोजक मानव इंटरल्यूकिन-6 (rhIL-6) या rhIL-6 के साथ घुलनशील IL-6 रिसेप्टर (sIL-6R) के संयोजन में प्रतिक्रिया में हुई। STAT1 के दो रूप, STAT1A और STAT1B, SDS-PAGE और एंटी-STAT1 एंटीबॉडी के साथ वेस्टर्न ब्लॉटिंग पर पहचाने गए। वेस्टर्न ब्लॉटिंग से पता चला कि STAT1 संवैधानिक रूप से फॉस्फोराइलेटेड (p-STAT1) था। हालाँकि rhIL-6 (50 ng/ml) के साथ T/C28a2 चोंड्रोसाइट्स के इनक्यूबेशन ने 30 मिनट के बाद p-STAT1A को Δ=22.3% तक बढ़ा दिया, यह प्रतिशत अंतर ची-स्क्वायर विश्लेषण द्वारा महत्व तक पहुँचने में विफल रहा। इसी तरह, 30 मिनट पर p-STAT1B पर rhIL-6 (Δ=+10.7%) का कोई प्रभाव नहीं देखा गया। इसके विपरीत, हालांकि rhIL-6 प्लस sIL-6R के संयोजन का p-STAT1A पर कोई प्रभाव नहीं था, rhIL-6 प्लस sIL-6R ने नियंत्रण समूह की तुलना में 30 मिनट के बाद p-STAT1B को Δ=73.3% (p<0.0001) और अकेले rhIL-6 की तुलना में Δ=56.7% (p<0.0001) बढ़ाया। जेनेक्स-1, एक जेनस किनेज-3-विशिष्ट अवरोधक (100 μM) ने p-STAT1B पर rhIL-6 के प्रभाव को आंशिक रूप से Δ=27.7% (p<0.05) कम किया। इस अध्ययन के परिणामों से पता चला कि STAT1A/STAT1B T/C28a2 कोन्ड्रोसाइट्स में संवैधानिक रूप से सक्रिय था। हालाँकि rhIL-6 ने p-STAT1B को कुछ हद तक बढ़ाया, लेकिन rhIL-6 और sIL-6R का संयोजन STAT1B फॉस्फोराइलेशन को उत्तेजित करने में नियंत्रण या अकेले rhIL-6 की तुलना में कहीं अधिक प्रभावी था। ये डेटा इस संभावना का समर्थन करते हैं कि हालाँकि T/C28a2 कोन्ड्रोसाइट्स में STAT1 की JAK3-मध्यस्थ सक्रियता IL-6/IL-6R/gp130 मार्ग को शामिल कर सकती है, लेकिन इन परिणामों ने संकेत दिया कि IL-6 के जवाब में STAT1 सक्रियता में sIL-6R के माध्यम से IL-6 ट्रांस-सिग्नलिंग को प्राथमिकता दी गई।