एंजाइम इंजीनियरिंग
खुला एक्सेस

अमूर्त

चुंबकीय वाहकों पर स्थिरीकरण के माध्यम से साइक्लोडेक्सट्रिन ग्लाइकोसिलट्रांसफेरेज़ का पुनः उपयोग

केट क्रिस्टीना ब्लैंको, फ़्रांसिस्को जोस डॉस सैंटोस, नतालिया सोज़ा बर्नार्डी, मिगुएल जफ़ेलिसी जूनियर, रूबेन्स मोंटी और जोनास कॉन्टिएरो

ब्राजील के साओ पाउलो राज्य में एक कसावा आटा मिल के अपशिष्ट जल से पृथक बैसिलस लेहेन्सिस से सीजीटीज़ को अमोनियम सल्फेट के साथ अवक्षेपण का उपयोग करके आंशिक रूप से शुद्ध करने के बाद स्थिर किया गया था। आंशिक रूप से शुद्ध किए गए सीजीटीज़ को मैग्नेटाइट सपोर्ट पर सहसंयोजक बंधन द्वारा स्थिर किया गया था, जिसे 3-एमिनोप्रोपाइलट्राइमेथॉक्सीसिलेन के साथ सिलेनाइज़ किया गया था और ग्लूटाराल्डिहाइड के साथ सक्रिय किया गया था, जिसके परिणामस्वरूप 16.27% की उपज और प्रारंभिक गतिविधि का 17.54% की अंतिम गतिविधि हुई। बैसिलस लेहेन्सिस से साइक्लोडेक्सट्रिन ग्लाइकोसिलट्रांसफेरेज़ के भौतिक-रासायनिक गुणों और गतिकी का निर्धारण किया गया। स्थिर किए गए सीजीटीज़ का इष्टतम तापमान घुलनशील एंजाइम (क्रमशः 70°C और 55°C) से अधिक था। स्थिर किए गए एंजाइम का इष्टतम pH घुलनशील एंजाइम (pH 8.0) के समान था। पीएच और ताप स्थिरता परीक्षणों में, 24 घंटे के बाद एंजाइम गतिविधि का 50% और 160 मिनट के बाद प्रारंभिक गतिविधि का 26.22% क्रमशः बनाए रखा गया। माइकेलिस-मेन्टेन स्थिरांक 0.82 mg.ml-1 था और अधिकतम वेग 45.45 mol.ml−1.min−1 था। चार चक्रों के बाद स्थिर एंजाइम के पुन: उपयोग अध्ययन में, प्रारंभिक उत्प्रेरक गतिविधि का 16.66% बनाए रखा गया, जो मैग्नेटाइट पर स्थिर एंजाइम को पुनः प्राप्त करने और पुन: उपयोग करने की क्षमता को प्रदर्शित करता है।