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कम कैलोरी वाले बल्क स्वीटनर डी-टैगैटोज़ के उत्पादन के लिए एल-अरेबिनोज़ आइसोमेरेज़ की अधिक अभिव्यक्ति

मोनिका वान होल्सबीक, इफ्स्ताथिया त्सकली, एवेलियन सिरिन, गुइडो एर्ट्स, जान वान इम्पे और इल्से वान डे वूर्डे

उच्च-कोशिका-घनत्व वाली खेती प्राकृतिक संसाधनों में उपलब्धता से कहीं अधिक मात्रा में पुनः संयोजक प्रोटीन का उत्पादन करने की एक बड़ी क्षमता दिखाती है। पुनः संयोजक प्रोटीन का एक दिलचस्प उदाहरण एल-अरबीनोज आइसोमेरेज है, जो डी-गैलेक्टोज को कम कैलोरी और कम ग्लाइसेमिक बल्क स्वीटनर डी-टैगेटोज में बदलने में सक्षम है। इस अध्ययन के भीतर, जियोबैसिलस स्टीयरोथर्मोफिलस से एल-अरबीनोज आइसोमेरेज को एस्चेरिचिया कोली में इंट्रासेल्युलर रूप से व्यक्त किया गया था। खेती के माध्यम में ग्लूकोज, खमीर निकालने और विभिन्न मैक्रो- और माइक्रोन्यूट्रिएंट्स शामिल थे। ई. कोली विकास और एल-अरबीनोज आइसोमेरेज की अभिव्यक्ति पर वायु प्रवाह दर के प्रभाव का अध्ययन किया गया। 52 घंटों के बाद, 0.2 और 30 एल मिनट-1 के बीच वायु प्रवाह दर को विनियमित करके क्रमशः 154 ± 4 और 54.8 ± 1.3 ग्राम एल-1 का ऑप्टिकल घनत्व और शुष्क कोशिका भार प्राप्त किया गया। 6.99 ± 0.46 यू एमएल-1 की संगत एल-अरबीनोज आइसोमेरेज गतिविधि प्राप्त की गई। उच्च-कोशिका-घनत्व संवर्धन का एक दोष उप-उत्पाद एसिटिक एसिड का उत्पादन है जो विकास को बाधित कर सकता है। हालांकि, इस यौगिक में निहित निरोधात्मक प्रभावों से बचने के लिए किण्वन के दौरान एसिटिक एसिड की सांद्रता को यथासंभव कम बनाए रखा गया था। उत्पादित एल-अरबीनोज आइसोमेरेज के साथ, 37.1 ± 1.5% का रूपांतरण प्रतिशत प्राप्त किया गया, जो 94.9 ± 3.7 ग्राम एल-1 डी-टैगेटोज के अनुरूप था। इस प्रकार, उच्च-कोशिका-घनत्व संवर्धन के कार्यान्वयन ने एल-अरबीनोज आइसोमेरेज एंजाइम और डी-टैगेटोज उत्पादन की एक कुशल अभिव्यक्ति को जन्म दिया। इसके अलावा 4 डिग्री सेल्सियस पर कई महीनों के दौरान कोशिकाओं की भंडारण स्थिरता की जांच की गई। 4 डिग्री सेल्सियस पर कम से कम 8 महीने के भंडारण के दौरान एक स्थिर एल-अरबीनोज आइसोमेरेज एंजाइम देखा गया।