जर्नल ऑफ़ सेल साइंस एंड थेरेपी
खुला एक्सेस

अमूर्त

एमडीएक्स चूहों के लिए नॉन-माइलोएबलेटिव बोन मैरो स्टेम सेल प्रत्यारोपण मायोडिस्ट्रॉफी थेरेपी

वीएम मिखाइलोव, एवी सोकोलोवा, वीवी क्रावत्सोवा, वीवी जेनिन, ईवी कमिंस्काया, एनए टिमोनिना और द्वितीय क्रिवोई

पृष्ठभूमि: Mdx चूहे बिना इलाज वाले मानव मोनोजेनिक रोग ड्यूचेन मस्कुलर डिस्ट्रॉफी (DMD) के प्रायोगिक मॉडल हैं। इलाज की उम्मीद स्टेम सेल थेरेपी के इस्तेमाल से जुड़ी है, खास तौर पर लेकिन खास तौर पर नहीं। कई प्रायोगिक परिणामों के विश्लेषण से पता चलता है कि स्टेम सेल गुणों के साथ अलग-अलग मूल की कोशिकाओं के इंट्रामस्क्युलर प्रत्यारोपण से म्यूटेंट धारीदार मांसपेशी फाइबर (SMF) को जंगली प्रकार के SMF में नहीं बदला जा सकता है। यह निष्कर्ष निकाला गया कि केवल जंगली प्रकार की BM कोशिकाओं द्वारा उत्परिवर्ती अस्थि मज्जा (BM) के प्रतिस्थापन से उत्परिवर्ती SMF को जंगली प्रकार के SMF में बदला जा सकता है। दुर्भाग्य से 11, 7 या 5 Gy की घातक खुराक पर mdx चूहों के एक्स-रे विकिरण के बाद जंगली C57BL/6 चूहों की BM कोशिकाओं के प्रत्यारोपण से SMF डिस्ट्रोफिन संश्लेषण में वृद्धि नहीं हुई। इस अध्ययन का उद्देश्य 3 Gy की खुराक के साथ एक्स-रे विकिरण के बाद C57BL/6 अस्थि मज्जा कोशिकाओं के प्रत्यारोपण के बाद mdx चूहों की धारीदार मांसपेशियों द्वारा डिस्ट्रोफिन संश्लेषण का विश्लेषण करना था। साथ ही हम डायाफ्राम मांसपेशी फाइबर NMJs की संरचना की मरम्मत की जांच करते हैं। NMJs के देखे गए संरचनात्मक परिवर्तनों के कार्यात्मक महत्व की पुष्टि करने के लिए डायाफ्राम मांसपेशी फाइबर NMJs की आराम झिल्ली क्षमता की एक जांच भी की गई थी। तरीके: 1-1.5 महीने के mdx चूहों को 3 Gy की खुराक पर एक्स-रे द्वारा विकिरणित किया गया। अगले दिन ताजा तैयार BM कोशिकाओं को (15-20) x 106 कोशिकाओं प्रति चूहे की मात्रा में अंतःशिरा में इंजेक्ट किया गया। चिमेरिज्म पंजीकरण के लिए 3 Gy विकिरण के बाद mdx चूहों में GFP-पॉजिटिव C57BL/6 BM कोशिकाओं के प्रत्यारोपण का उपयोग करके एक विशेष अध्ययन किया गया था। 6 महीने के दौरान BM कोशिकाओं को लंबी हड्डियों से अलग किया गया और स्मीयर तैयार किए गए। कार्बिनोल फिक्सेशन के बाद स्मीयर को प्रोपिडियम आयोडाइड द्वारा दाग दिया गया और परमाणु कोशिकाओं की पूरी मात्रा के संबंध में GFP-पॉजिटिव कोशिकाओं के हिस्से की गणना करने के लिए कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप LSM 5 पास्कल (कार्ल ज़ीस, जर्मनी) पर अध्ययन किया गया। परिणाम: हमने 3 Gy की खुराक पर गैर-घातक एक्स-रे विकिरण के बाद डिस्ट्रोफिन संश्लेषण की एक स्थिर वृद्धि देखी। प्रत्यारोपण के बाद एम. क्वाड्रिसेप्स फेमोरिस के डिस्ट्रोफिन पॉजिटिव SMF का हिस्सा 1% से 4% (2 महीने), 12% (4 महीने) और 27% (6 महीने) तक बढ़ गया। डिस्ट्रोफिन संश्लेषण की वृद्धि के साथ एसएमएफ मृत्यु स्तर में कमी, केंद्रीय नाभिक के बिना एसएमएफ के भाग में 22% तक की वृद्धि, एमएनजे शाखाओं के संचय और आराम करने वाली झिल्ली क्षमताओं की मरम्मत के साथ हुई। प्रत्यारोपण के 6 महीने बाद चिमेरिक जीएफपी प्रत्यारोपित एमडीएक्स चूहों के बीएम स्मीयर पर नाभिक के साथ सभी कोशिकाओं के बीच जीएफपी-पॉजिटिव कोशिकाओं का हिस्सा 3.3 ± 0.8% था जो चूहों की चिमेरिक प्रकृति को दर्शाता है। निष्कर्ष: एक्स-रे विकिरण 3 Gy के बाद एमडीएक्स चूहों के गैर मायलोब्लेटिव अस्थि मज्जा कोशिका प्रत्यारोपण के साथ चिमेरिज्म का गठन होता है,डिस्ट्रोफिन संश्लेषण की स्थिर वृद्धि और एनएमजे की संरचना और कार्य की मरम्मत।