इम्यूनोथेरेपी: ओपन एक्सेस
खुला एक्सेस
आईएसएसएन: 2471-9552
आईएसएसएन: 2471-9552
जिहाद सैयद, जैक एश्टन, जेसुक्रिस्टोफर जोसेफ, जेम्मा एन जोन्स, क्रिश्चियन स्लेटर, एलन शार्प, गैरी एश्टन, विलियम हॉवेट, रिचर्ड बायर्स, हेलेन के एंजेल
उद्देश्य: कैंसर जैसी बहुक्रियात्मक बीमारियों की जटिलता, व्यक्तिगत उपचारों के विकास के लिए महत्वपूर्ण चुनौतियाँ पेश करती है। ट्यूमर का एकीकृत डिजिटल हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण प्रतिरक्षा माइक्रोएनवायरनमेंट और विशिष्ट ट्यूमर घुसपैठ लिम्फोसाइट (टीआईएल) उप-जनसंख्या की गणना और वितरण से जुड़े रोगसूचक संबंध की बेहतर समझ प्रदान करता है। इस प्रभाव के लिए मल्टीप्लेक्स सेल लेबलिंग, मल्टी-स्पेक्ट्रल इमेजिंग (एमएसआई) के साथ-साथ अधिक सटीक इन-सीटू टीआईएल फेनोटाइपिंग और मात्रा का पता लगाने के लिए तेजी से उपयोग किया जाने वाला एक तरीका है। हालाँकि, इन तरीकों को उपयोग से पहले पूर्ण सत्यापन की आवश्यकता होती है, जो इस अध्ययन का मूल उद्देश्य है।
विधियाँ: लिम्फोसाइट-समृद्ध ऊतक के पूरे खंड और ऊतक माइक्रोएरे का उपयोग छह प्रतिरक्षा कोशिका प्रतिजनों की एक साथ MSI पूछताछ के लिए मल्टीप्लेक्स इम्यूनोफ्लोरेसेंस (IF) प्रोटोकॉल को विकसित करने और मान्य करने के लिए किया गया था; CD3, CD8, FOXP3, CD20, PD-L1 और PD1। सिंगल-प्लेक्स क्रोमोजेनिक इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (IHC) और सिंगल-प्लेक्स इम्यूनोफ्लोरेसेंस (IF) धुंधलापन के बीच सामंजस्य पहले हासिल किया गया था। इसके बाद, किसी भी दिए गए एंटीबॉडी के लिए मल्टीप्लेक्स IF ऑर्डर में स्थिति के प्रभाव की जांच की गई, एंटीबॉडी स्टेरिक बाधा और एंटीबॉडी स्ट्रिपिंग स्थितियों के प्रभाव को समझा गया।
परिणाम: उन विधियों में जहां पूर्व एंटीबॉडी को हटाने के लिए एंटीजन रिट्रीवल का उपयोग करके मल्टीप्लेक्सिंग को सक्षम किया जाता है, मल्टीप्लेक्स-परख सत्यापन को प्रभावित करने वाला प्रमुख संयोजन कारक ऊष्मा-प्रेरित एपिटोप रिट्रीवल (HIER) के विस्तारित समय का गैर-रैखिक और गैर-समान प्रभाव था, क्योंकि एंटीबॉडी मल्टीप्लेक्स प्रोटोकॉल में क्रम से आगे बढ़ते हैं।
निष्कर्ष: यह अध्ययन सिंगल-प्लेक्स स्टेनिंग के प्रतिनिधि के रूप में मल्टीप्लेक्स स्टेनिंग की विश्वसनीयता, एंटीबॉडी स्टेनिंग के क्रम के प्रभाव को प्रदर्शित करता है, और अनुकूलित मल्टीप्लेक्स इम्यूनोफ्लोरोसेंट प्रोटोकॉल की पीढ़ी के लिए एक रूपरेखा प्रदान करता है।