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तीव्र एंटी-साइक्लिक सिट्रुलिनेटेड पेप्टाइड (एंटी-सीसीपी) का पता लगाने के लिए संयुग्मित चुंबकीय नैनोकणों के साथ माइक्रोडिवाइस इम्यूनोएसे

केनिया चावेज़ रामोस, मारिया डेल पिलर कैनिज़ारेस मैकियास

एंटी-साइक्लिक सिट्रुलिनेटेड पेप्टाइड IgG इम्यूनोटॉक्सिन (एंटी-CCP) को पोस्ट-ट्रांसलेशनल संशोधित पेप्टाइड्स की उपस्थिति में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के रूप में उत्पादित किया जाता है, जिन्हें साइक्लिक सिट्रुलिनेटेड पेप्टाइड्स (CCP) के रूप में जाना जाता है। एंटी-CCP को रुमेटीइड गठिया (RA) के विश्लेषण के लिए विशिष्ट बायोमार्कर माना जाता है, और उनकी उच्च विशिष्टता के कारण, अन्य आमवाती रोगों का विभेदक निदान करना संभव है। इन इम्यूनोटॉक्सिन का पता RA के शुरुआती चरणों में और यहाँ तक कि बीमारी के पहले लक्षण दिखने से 10 साल पहले भी लगाया जा सकता है, जिससे समय पर उपचार के लिए अवसर की एक खिड़की खुल जाती है। एंटी-CCP का पता लगाने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (ELISA) है। इसकी अत्यधिक संवेदनशीलता के बावजूद, ELISA को समय लेने वाली परख माना जाता है। इस कार्य में, एंटी-सीसीपी की मात्रा निर्धारित करने के लिए ठोस समर्थन के रूप में एक सरल सीधे चैनल माइक्रोडिवाइस और सीसीपी संयुग्मित चुंबकीय नैनोकण (एमएनपी-सीसीपी) विकसित किए गए और प्लाज्मा के लिए जांच की गई। स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण के लिए ऑप्टिकल फाइबर के साथ युग्मित ऑप्टिकल फ्लो जेड सेल डिज़ाइन वाले एक माइक्रोडिवाइस का उपयोग किया गया था। केवल 6 L नमूना और अभिकर्मकों का उपयोग करने वाला माइक्रोडिवाइस इम्यूनोएसे, एक वाणिज्यिक एंटी-सीसीपी एलिसा किट की तुलना में लगभग नौ गुना तेज था, लेकिन समकक्ष परिणाम प्राप्त हुए। पहचान सीमा 0.70-2000 यू एमएल-1 थी जिसमें 0.70 यू एमएल-1 की खोज की बाधा थी (एलिसा पैक के बारे में सोचे गए से 16 गुना अधिक नाजुक)। माइक्रोडिवाइस इम्यूनोएसे, जिसमें एमएनपी-सीसीपी का गठन किया गया है, सीसीपी मूल्यांकन के लिए एक सरल तकनीक है जो एलिसा पैक की तुलना में कम खर्चीली, तेज और अधिक नाजुक है। धीरे-धीरे, RA निर्धारण में एंटी-सिट्रुलिनेटेड पेप्टाइड इम्यूनोटॉक्सिन (ACPA) के स्थान के लिए उपायों का उपयोग किया जाता है। यह समीक्षा ACPA परीक्षणों के जैविक आधार और विकास, उपलब्ध ACPA उपायों और उनकी प्रस्तुति विशेषताओं, और अकेले ACPA के विश्लेषणात्मक गुणों और प्रारंभिक RA में रुमेटी कारक (RF) के साथ तुलना का सारांश देती है। हम उपलब्ध परीक्षणों के संबंध, सटीकता, लागत और लागत-व्यवहार्यता, उपलब्धता, सुदृढ़ता और पुनरुत्पादकता का भी सर्वेक्षण करते हैं। एक साथ लिया गया, डेटा दिखाता है कि प्रारंभिक RA के लिए ACPA में RF की तुलना में अधिक विशिष्टता है, अच्छी पूर्वानुमान वैधता, उच्च संवेदनशीलता, स्पष्ट लागत-पर्याप्तता और अच्छी ताकत और पुनरुत्पादकता है। अपने प्रमुख निष्पादन गुणों और बढ़ती उपलब्धता को देखते हुए, ACPA RA के निदान के लिए सबसे मूल्यवान एकल परीक्षण के रूप में उभर रहा है। प्रारंभिक रुमेटी गठिया (RA) का निर्धारण इतिहास और शारीरिक परीक्षण निष्कर्षों, अनुसंधान सुविधा और रेडियोग्राफिक परिणामों सहित नैदानिक ​​उपायों पर निर्भर करता है। आरए में अक्सर अपरिवर्तनीय क्षति तुरंत ही हो जाती है। क्षति और अक्षमता को रोकने के लिए प्रारंभिक निदान और सशक्त उपचार का समर्थन करने वाले बढ़ते प्रमाणों के साथ, प्रारंभिक आरए की पहचान और पता लगाने में सुधार की आवश्यकता है। हाल ही में, रुमेटी कारक (आरएफ) को अलग करने वाले उपाय,इम्यूनोग्लोबुलिन जी (आईजीजी) परमाणु के एफसी भाग के खिलाफ समन्वित इम्यूनोटॉक्सिन, आरए की खोज के लिए आवश्यक सीरोलॉजिकल परीक्षण रहे हैं। पिछले दशक में बनाए गए और लोकप्रिय किए गए सिट्रुलिनेटेड पेप्टाइड काउंटर एक्टिंग एजेंट (एसीपीए) परीक्षणों का वर्तमान में नैदानिक ​​​​रूप से उपयोग किया जा रहा है। चूंकि एसीपीए आरए के लक्षणों की शुरुआत से पहले मौजूद होते हैं और आरए के विकास की भविष्यवाणी करते हैं, इसलिए वे रोग के शुरुआती दौर में एक मूल्यवान नैदानिक ​​​​परीक्षण हैं। यह समीक्षा प्रारंभिक आरए के निदान के लिए आरएफ और एसीपीए के नैदानिक ​​​​गुणों के बारे में वर्तमान में उपलब्ध डेटा को संश्लेषित करती है। हम हाल ही में उनके विकास और प्रारंभिक, अविभेदित आरए की बेहतर पहचान में उनकी संभावित भूमिका को देखते हुए एसीपीए पर ध्यान केंद्रित करते हैं। इस समीक्षा में शामिल डेटा चिकित्सा साहित्य खोजों, वेबसाइटों और परखों का विपणन करने वाली कंपनियों के संपर्क और क्षेत्र के विशेषज्ञों से प्राप्त जानकारी और राय से प्राप्त किए गए थे। हमने ACPA परीक्षणों के जैविक आधार और विकास, उपलब्ध परीक्षणों और परीक्षण प्रदर्शन विशेषताओं से संबंधित आंकड़ों, विशेष रूप से सहकर्मी-समीक्षित पत्रिकाओं में प्रकाशित, लेकिन निर्माताओं द्वारा प्रचारित आंकड़ों की जानकारी शामिल की है। इन परीक्षणों के नैदानिक ​​गुणों, जिसमें संवेदनशीलता, विशिष्टता, सकारात्मक और नकारात्मक भविष्य कहनेवाला मूल्य शामिल हैं, लेकिन इन्हीं तक सीमित नहीं हैं, की समीक्षा की गई है। 1940 में, वालर ने देखा कि RA रोगी के सीरम को IgG-संवेदी भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के साथ मिलाने से रक्त-अपघटन बाधित हुआ, लेकिन कोशिकाओं में समूहन हुआ। रोज़ और उनके सहयोगियों ने बाद में बताया कि RA सीरम ने खरगोश विरोधी भेड़ एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी से लेपित भेड़ एरिथ्रोसाइट्स को स्वस्थ व्यक्तियों के सीरम की तुलना में अधिक समूहीकृत किया। एग्लूटिनेशन टेस्ट केवल RF IgM को मापता है और यह सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला परीक्षण है। एग्लूटिनेशन परीक्षणों को टिटर या यूनिट के रूप में रिपोर्ट किया जाता है। सकारात्मकता के लिए कट-ऑफ निर्माताओं द्वारा निर्धारित किए जाते हैं और स्वस्थ नियंत्रण की तुलना में RA रोगियों के परिणामों पर आधारित होते हैं। एग्लूटिनेशन परीक्षणों में RA के लिए संवेदनशीलता 70-85% और विशिष्टता 40-90% तक होती है, क्योंकि RA के बिना व्यक्तियों में एग्लूटिनेशन हो सकता है। RF के लिए अन्य परीक्षण विकसित किए गए हैं, जिनमें एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परीक्षण (ELISAs), रेडियोइम्यून परीक्षण (RIAs), और लेजर या रेट नेफेलोमेट्री तकनीक शामिल हैं। IgA और IgG RF का पता लगाने के लिए परीक्षण भी उपलब्ध हैं। इन तकनीकों द्वारा RA निदान के लिए RF की संवेदनशीलता 50-90% और विशिष्टता 50-95% है। ये विस्तृत श्रृंखलाएँ परीक्षण की गई आबादी में अंतर को दर्शाती हैं। स्थापित आरए रोगियों, स्वस्थ नियंत्रण और गैर-सूजन संयुक्त रोग वाले रोगियों के समूहों में आरएफ पहचान तकनीकों की सीधे तुलना करने वाले अध्ययनों ने लेटेक्स एग्लूटिनेशन परीक्षण प्रदर्शन को नेफेलोमेट्री और रेडियोइम्यून परख के समान बताया है। 1998-2005 से आरएफ परख के 50 अध्ययनों के मेटा-विश्लेषण में,पूल किए गए संभावना अनुपात (संवेदनशीलता और विशिष्टता दोनों पर निर्भर) IgM, IgA और IgG RF परख के लिए मात्रात्मक रूप से समान थे, और सकारात्मकता के लिए उच्च बनाम निम्न RF टिटर का उपयोग करने के लिए। झूठे सकारात्मक RF परिणाम आमतौर पर जीर्ण संक्रमण, घातक बीमारी और अन्य आमवाती रोगों की सेटिंग में होते हैं। RF का पता 1-4% स्वस्थ युवा व्यक्तियों के सीरम में और RA से रहित बुज़ुर्ग व्यक्तियों के उच्च प्रतिशत में लगाया जाता है। हालाँकि, RF परख व्यापक रूप से उपलब्ध है, अपेक्षाकृत सस्ती है, और प्राथमिक देखभाल चिकित्सकों और गठिया विशेषज्ञों दोनों द्वारा समझी जाती है।1964 में, निएनहुइस और उनके सहकर्मियों ने एक ऑटोएंटीबॉडी का वर्णन किया जिसे उन्होंने एंटी-पेरिन्यूक्लियर फैक्टर कहा। मानव मुख म्यूकोसा कोशिकाओं पर अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस परीक्षण द्वारा पता लगाया गया, एंटी-पेरिन्यूक्लियर फैक्टर ने नाभिक के चारों ओर केराटोहायलिन कणिकाओं में मौजूद एंटीजन को पहचाना। एंटी-पेरिन्यूक्लियर फैक्टर 90% तक स्थापित आरए रोगियों में मौजूद था, जिसमें 73-99% विशिष्टता थी। यंग और उनके सहकर्मियों ने बाद में चूहे के अन्नप्रणाली के क्राई सेक्शन पर अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस का उपयोग करके एंटी-केराटिन एंटीबॉडी का पता लगाया ।