जर्नल ऑफ़ मेडिकल डायग्नोस्टिक मेथड्स
खुला एक्सेस

अमूर्त

मानव शुक्राणु में डीएनए के कम घनत्व वाले क्षेत्र प्रतिक्रियाशील नीले रंग के साथ पारभासी धुंधलापन के बाद रिक्तिका के रूप में दिखाई देते हैं 2

सतरू कानेको, जोजी योशिदा और कियोशी ताकामात्सू

मानव शुक्राणु में अक्सर रिक्तिकाएँ होती हैं, और इसलिए यह निर्धारित करना आवश्यक है कि गुणसूत्र क्षेत्र में रिक्तिकाएँ डीएनए की गिरावट के लिए जिम्मेदार हैं या नहीं। इस उद्देश्य से, वर्तमान अध्ययन ने रिक्तिकाओं के दृश्य के लिए एक नई नैदानिक ​​​​जांच तकनीक, पारभासी धुंधलापन विकसित किया है। अत्यधिक पतला रिएक्टिव ब्लू 2 (RB2, 100 pmol/L) ने शुक्राणु के सिर को हल्का सा रंग दिया, जिससे एक पारभासी नीला शरीर दिखाई दिया जिसमें रंगहीन धब्बे थे। विभेदक हस्तक्षेप कंट्रास्ट ने रिक्तिकाओं को छायांकित-राहत छवियों के रूप में दिखाया। उसी दृश्य क्षेत्र में, रंगहीन धब्बों का स्थानीयकरण और आकार छायांकित-राहत छवियों के साथ मेल खाता था।

आरबी2 और डीएनए फ्लोरोसेंट डाई के साथ दोहरे धुंधलापन ने सुझाव दिया कि रिक्तिकाओं में रिक्त या कम घनत्व वाला डीएनए शामिल हो सकता है। वर्तमान परिणामों ने नैदानिक ​​सहायक प्रजनन तकनीक (एआरटी) में महत्वपूर्ण मुद्दों को उजागर किया, अर्थात, रूपरेखा या गतिशीलता की सामान्यता की परवाह किए बिना कई प्रकार की रिक्तिकाएँ शामिल थीं। विशेषताओं को तीन श्रेणियों में वर्गीकृत किया गया: शून्य या एक छोटी रिक्तिका; विभिन्न आकारों की कई छिटपुट रिक्तिकाएँ; और एक बड़ी रिक्तिका। इसके अलावा, घनत्व ढाल सेंट्रीफ्यूजेशन और उसके बाद स्विम अप जैसे इन विट्रो प्रसंस्करण चरणों में रिक्तिकाओं के बिना शुक्राणु को अलग नहीं किया जा सका।

चूंकि यह अभी भी अज्ञात है कि क्या रिक्तिकाएं केवल डीएनए को नुकसान पहुंचाए बिना उसे आसपास की ओर धकेलती हैं, या खाली क्षेत्र डीएनए क्षरण का परिणाम है, रूपरेखा और रिक्तिकाओं के एक साथ दृश्य के लिए पारदर्शी अभिरंजन, पूर्व-एआरटी कोशिका-निदान के लिए एक प्रमुख कदम है, ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि शुक्राणु आबादी नैदानिक ​​आईसीएसआई में उपयोग के लिए सक्षम है या नहीं।