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कैप्सिकम एनम एलजीलुटामिनेज का पृथक्करण, गतिकी और इन विट्रो एंटी-ल्यूकेमिक गतिविधि

मोहननाद इड्रेस, मोहम्मद सलीम, एशिया अल-हसन

इस अध्ययन का उद्देश्य हरी मिर्च से पृथक प्राकृतिक रूप से पाए जाने वाले एल-ग्लूटामिनेज को एंटी-ल्यूकेमिक दवा के रूप में विकसित करने की क्षमता की खोज करना है जो अन्य गैर-चयनित कीमोथेरेप्यूटिक्स के विपरीत कैंसर कोशिका चयापचय को चुनिंदा रूप से लक्षित करता है। यह एल-ग्लूटामिनेज गतिविधि के लिए इसकी विशिष्ट गतिविधि और इष्टतम स्थिति के निर्धारण के बाद आंशिक शुद्धिकरण और इन विट्रो साइटोटोक्सिसिटी परख द्वारा किया गया था। फलों के जलीय अर्क में नेस्लेराइजेशन विधि द्वारा तरल नाइट्रोजन में होमोजिनाइजेशन और 0.05 एम सोडियम बोरेट बफर (पीएच 8.5) के साथ निष्कर्षण के बाद एलग्लूटामिनेज की गतिविधि को मापा गया। परिणामों से पता चला कि प्रति मिलीग्राम कुल प्रोटीन में एलग्लूटामिनेज गतिविधि 18.7 यू/एमजी थी परिणामों से पता चला कि एल-ग्लूटामिनेज की अधिकतम सक्रियता तब प्राप्त हुई जब एंजाइम को पीएच 7.2 पर फॉस्फेट बफर सलाइन की उपस्थिति में 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए 250 एमएम एल-ग्लूटामाइन के साथ इनक्यूबेट किया गया। एल-ग्लूटामिनेज का अधिकतम वेग (Vmax) और आत्मीयता स्थिरांक (Km) क्रमशः 14.1 एमएम और 90.2 एमएम थे। कच्चे एल-ग्लूटामिनेज को 20% से 80% संतृप्ति तक के अमोनियम सल्फेट की सात अलग-अलग सांद्रता का उपयोग करके नमक डालकर शुद्ध किया गया था। 50% अमोनियम सल्फेट घोल में नमक डालने पर शुद्ध एल-ग्लूटामिनेज की विशिष्ट सक्रियता 18.7 से 98.5 यू/एमजी तक बढ़ गई थी। इस परिणाम ने शुद्धिकरण तकनीक के रूप में अमोनियम सल्फेट अवक्षेपण की उच्च दक्षता का संकेत दिया। एंटी-ल्यूकेमिक गुण का आकलन एल-ग्लूटामिनेज की साइटोटोक्सिसिटी की तुलना डॉक्सोरूबिसिन से करके और एमटीटी परख द्वारा टीएचपी-1 सेल लाइन के खिलाफ उनके संयोजन से किया गया। परिणामों ने एंजाइम के साथ संयोजन के मामले में 72.75% के अवरोध प्रतिशत के साथ महत्वपूर्ण कैंसर विरोधी गतिविधि दिखाई, जब अकेले एंजाइम (60.28%) की तुलना की गई। इन निष्कर्षों ने निष्कर्ष निकाला कि हरी मिर्च के एल-ग्लूटामिनेज को मिर्च में इसकी उच्च सामग्री, शुद्धिकरण में आसानी और मानव मोनोसाइटिक ल्यूकेमिया कोशिकाओं के खिलाफ महत्वपूर्ण साइटोटोक्सिसिटी के कारण एंटी-ल्यूकेमिक एजेंट के रूप में विकसित किया जा सकता है।