एंटीवायरल और एंटीरेट्रोवाइरल जर्नल
खुला एक्सेस

अमूर्त

कैलिब्राचोआ मोटल वायरस (सीबीएमवी) के संक्रामक पूर्ण-लंबाई क्लोन

अंजू गुलाटी-सखुजा और ह्सिंग-ये लियू

कैलिब्राचोआ मोटल वायरस (CbMV) के जीनोमिक RNA (gRNA) और सबजीनोमिक RNA (sgRNA) से प्राप्त पूर्ण लंबाई वाले cDNA क्लोन T7 RNA प्रमोटर के नियंत्रण में बनाए गए और प्लास्मिड pUC-18 में लिगेट किए गए। पूर्ण लंबाई वाले जीनोमिक cDNA क्लोन pUC-CbMV-FL से संश्लेषित कैप्ड और अनकैप्ड इन विट्रो ट्रांसक्रिप्ट ने 10 से 15 दिनों के बाद यांत्रिक रूप से टीका लगाए गए चेनोपोडियम क्विनोआ पर क्लोरोटिक स्थानीय घाव उत्पन्न किए। टीका लगाए गए लक्षणात्मक पत्तियों से प्राप्त संतति विरिऑन में पैतृक विरिऑन के समान ही रूपात्मक गुण थे। इन विरिऑन को डबल एंटीबॉडी सैंडविच एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (DAS-ELISA) में CbMV एंटीसेरम के साथ सकारात्मक रूप से प्रतिक्रिया दी जाती है और वायरल कोट प्रोटीन का पता वेस्टर्न ब्लॉटिंग द्वारा लगाया जाता है। सीबीएमवी जीनोम पर पांच ओपन रीडिंग फ्रेम (ओआरएफ) की उपस्थिति और जीआरएनए और एसजीआरएनए द्वारा संबंधित प्रोटीन के संश्लेषण की पुष्टि नॉर्दर्न ब्लॉटिंग और इन विट्रो ट्रांसलेशन द्वारा की गई। सीबीएमवी के तीन एसजीआरएनए के प्रतिलेखन प्रारंभ स्थल का भी निर्धारण किया गया। सीबीएमवी के पूर्ण लंबाई वाले संक्रामक सीडीएनए क्लोन के सफल निर्माण से आणविक उपकरण विकसित करना संभव हो गया है जिसका उपयोग इस वायरस के जीन कार्यों को समझने के लिए किया जा सकता है।