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ज़ेब्राफ़िश में जीनों का माइक्रो आरएनए-मध्यस्थ दमन

खालिद सईद

ऑर्थोलॉगस जीन की प्रचुरता के कारण जो मनुष्यों में पाए जाने वाले प्रोटीन के बराबर प्रोटीन को एनकोड करते हैं, ज़ेब्राफ़िश (डैनियो रेरियो) मानव रोग के अध्ययन के लिए एक आशाजनक मॉडल के रूप में उभरी है। ज़ेब्राफ़िश जीनोम को केवल उपकरणों के एक छोटे से सेट के साथ संशोधित किया जा सकता है, और अब उपयोग में आने वाली कई विधियाँ या तो विकास के शुरुआती चरणों में सफल होती हैं (जैसे कि मॉर्फोलिनो-आधारित एंटीसेंस तकनीक) या विशिष्ट जीन नॉकडाउन (जैसे कि रासायनिक उत्परिवर्तन) प्रदान किए बिना फेनोटाइपिक रूप से संचालित होती हैं। RNA हस्तक्षेप का उपयोग विवादास्पद रहा है क्योंकि ऑफ-टारगेट प्रभाव फेनोटाइपिक परिणामों की व्याख्या करना चुनौतीपूर्ण बना सकते हैं। इस समस्या को miRNA निर्माणों के साथ ज़ेब्राफ़िश लाइनों को विकसित करके संभाला गया है जो स्थिर रूप से एकीकृत हैं और रुचि के वांछित जीन को लक्षित करते हैं। इस अध्ययन में, हम प्रदर्शित करते हैं कि एक अस्थायी इन विवो eGFP सेंसर परीक्षण सेटअप में व्यावसायिक रूप से, miRNA बैकबोन ज़ेब्राफ़िश में eGFP नॉकडाउन का उत्पादन करने में सफल है। हमने इस तकनीक का उपयोग लॉन्ग क्यूटी सिंड्रोम, जो कि एक मानव हृदय रोग है, से संबंधित प्रतिलेखों को नष्ट करने के लिए करने का निर्णय लिया।