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जैविक नमूनों में एट्रैक्टाइलोड्स लैंसिया और इसके जैवसक्रिय घटक एट्रासाइक्लोडिन की जैवसक्रियता के निर्धारण के लिए उच्च-थ्रूपुट जैवपरीक्षण और एचपीएलसी-यूवी विधियां : उन्नत-चरण कोलेंजियोकार्सिनोमा वाले रोगियों में फार्माकोकाइनेटिक अध्ययन के लिए अनुप्रयोग

अनुराक चेओमांग, नडडा मुहम्मद, इंथुओन कुलमा, केसरा ना-बंगचांग*

अध्ययन का उद्देश्य मानव सीरम नमूनों में एट्रैक्टाइलोड्स लैंसिया (एएल) की कुल जैव सक्रियता के निर्धारण के लिए एक उच्च-थ्रूपुट बायोएसे विधि स्थापित करना था। इसके अलावा, एएल के मुख्य जैव सक्रिय घटक, एट्रैक्टाइलोडिन (एटीडी) के प्लाज्मा सांद्रता के निर्धारण के लिए एक सरल एचपीएलसी-यूवी विधि भी विकसित की गई थी। बायोएसे विधि के लिए, स्टैफिलोकोकस ऑरियस (एस. ऑरियस) एटीसीसी 25923 स्ट्रेन को एक परीक्षण जीव के रूप में इस्तेमाल किया गया था। एमटीटी परख का उपयोग करके बैक्टीरिया के विकास के अवरोध का आकलन किया गया। सीरम में सांद्रता प्रतिक्रिया वक्र (0, 0.39, 0.78, 1.56, 3.13, 2.56, और 50 एनजी/µl) से अंशांकन वक्र तैयार किया गया था, जो 0.990 से बेहतर सहसंबंध गुणांक के साथ रैखिक था। 20 µl सीरम नमूनों का उपयोग करके परिमाणीकरण की सीमा (LOQ) 1.66 µg/ml थी। एचपीएलसी-यूवी परख प्रक्रिया को हाइपरसिल गोल्ड सी18 कॉलम और 70:30 (v:v) के अनुपात में एसिटोनाइट्राइल और पानी से युक्त इल्यूशन सॉल्वेंट का उपयोग करके रिवर्स-फेज क्रोमैटोग्राफी के आधार पर विकसित किया गया था। यूवी डिटेक्शन को 340 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर सेट किया गया था। अंशांकन वक्र सीरम (0, 0.39, 0.78, 1.56, 3.13, 2.56, और 50 एनजी/µl) में सांद्रता-प्रतिक्रिया वक्र से तैयार किया गया था, जो सहसंबंध गुणांक (आर) 0.990 से बेहतर के साथ रैखिक था। 1 मिली प्लाज्मा नमूने का उपयोग करके LOQ 2.5 एनजी/एमएल था। दोनों परख विधियाँ AL की सीरम बायोएक्टिविटी और ATD की प्लाज्मा सांद्रता के विशिष्ट, संवेदनशील, सटीक और पुनरुत्पादनीय मात्रात्मक विश्लेषण थे। उन्नत अवस्था वाले कोलेंजियोकार्सिनोमा से पीड़ित पांच रोगियों में ए.एल. अर्क की कुल जैवसक्रियता (एंटीकोलेंजियोकार्सिनोमा गतिविधि) के फार्माकोकाइनेटिक अध्ययन के लिए इन विधियों को सफलतापूर्वक लागू किया गया।