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बैक्टीरिया की आनुवंशिक इंजीनियरिंग जो यूरेट ऑक्सीडेज का उत्पादन कर सकती है

शिन चेंग, बो यांग, डोंग लियू, एल जुआन हे, गण चेन, योंग चेन, आर फा हुआंग और वाई शेंग जियांग

यूरेट ऑक्सीडेज जीन को लैक्टोबैसिलस बुल्गारिया में क्लोन किया गया था ताकि यूरिक एसिड को विघटित करने और हाइपरयूरिसीमिया का इलाज करने के लिए यूरेट ऑक्सीडेज का उत्पादन किया जा सके। GenBank पर कैंडिडा यूटिलिस यूरेट ऑक्सीडेज जीन अनुक्रम (यूरिकेज, E12709) का उपयोग करते हुए, पीसीआर-प्रवर्धित यूरेट ऑक्सीडेज जीन के टुकड़ों को प्लास्मिड pMG36e में डाला गया ताकि पुनः संयोजक प्लास्मिड PMG36e-U का निर्माण किया जा सके, जिसे फिर लैक्टोबैसिलस बुल्गारिया में इलेक्ट्रोट्रांसफॉर्म किया गया। हमने आनुवंशिक रूप से इंजीनियर बैक्टीरिया के सेल लाइसेट्स में यूरेट ऑक्सीडेज की पहचान करने और यूरेट ऑक्सीडेज गतिविधि को मापने के लिए SDS-PAGE का उपयोग किया। यूरेट ऑक्सीडेज जीन को कैंडिडा यूटिलिस जीनोम से पीसीआर-प्रवर्धित किया गया था। यूरेट ऑक्सीडेज जीन युक्त पुनः संयोजक प्लास्मिड PMG36e-U को लैक्टोबैसिलस बुल्गारिया में सफलतापूर्वक इलेक्ट्रोट्रांसफॉर्म किया गया। आनुवंशिक रूप से इंजीनियर बैक्टीरिया द्वारा संश्लेषित यूरेट ऑक्सीडेज सबयूनिट का आणविक भार SDS-PAGE के आधार पर लगभग 34 KD था, और बैक्टीरिया की तैयारी से इन विट्रो एंजाइमेटिक गतिविधि 0.33 u/mL तक थी। निष्कर्ष: यूरेट ऑक्सीडेज जीन को लैक्टोबैसिलस बुल्गारिया में क्लोन किया गया और यूरिक एसिड को सफलतापूर्वक विघटित किया गया।