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अल्फावायरस रेप्लिकॉन पार्टिकल्स-एक्सप्रेस्ड एंटीजन से टीका लगाए गए सूअरों में क्लासिकल स्वाइन फीवर वायरस (सीएसएफवी)-विशिष्ट आईजीए, आईजीजी और आईजीएम एंटीबॉडी प्रतिक्रिया का मूल्यांकन

मोहम्मद एम हुसैन* और रेमंड आरआर रोलैंड

क्लासिकल स्वाइन फीवर वायरस (CSFV) E2 ग्लाइकोप्रोटीन को अल्फावायरस आधारित रेप्लिकॉन पार्टिकल्स (RP) एक्सप्रेशन सिस्टम में व्यक्त किया गया था। अल्फावायरस RP से टीका लगाए गए सूअरों में CSFV E2-विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्फीयर इम्यूनोसे (FMIA) विकसित किया गया है। CSFV की पूरी लंबाई E2 (aa 1-376) को कई टुकड़ों में विभाजित किया गया और एस्चेरिचिया कोली में पुनः संयोजक प्रोटीन व्यक्त किए गए। शुद्ध किए गए प्रोटीन को माइक्रोस्फीयर बीड्स से जोड़ा गया, लक्ष्य एंटीजन को एक मल्टीप्लेक्स में इकट्ठा किया गया और अल्फावायरस-एक्सप्रेस्ड एंटीजन से टीका लगाए गए सीरा के खिलाफ परीक्षण किया गया। परिणामों को कम से कम 100 माइक्रोस्फीयर के लिए औसत मूल्य से प्राप्त औसत फ्लोरोसेंस तीव्रता (MFI) के रूप में रिपोर्ट किया गया और MFI मानों को प्रति नमूना (S/P) अनुपात में सकारात्मक रूपांतरित किया गया। इस अध्ययन में मूल्यांकन किए गए आठ पुनः संयोजक E2 प्रोटीनों में से, E2 (aa 1-181) के लिए उच्चतम MFI मान प्राप्त किए गए। CSFV E2 ग्लाइकोप्रोटीन को अल्फावायरस आधारित रेप्लिकॉन अभिव्यक्ति प्रणाली में व्यक्त किया गया था। परिणाम बताते हैं कि टीका लगाए गए जानवरों के सीरम और मौखिक तरल पदार्थों में CSFV-विशिष्ट IgA, IgG और IgM थे। नकारात्मक सीरम नमूने के लिए MFI मानों ने सकारात्मक सीरम नमूने की तुलना में 20-70 गुना कमी दिखाई। CSFV एंटीजन के लिए एंटीबॉडी प्रतिक्रिया IgG>IgM>IgA थी। परिणामों ने प्रदर्शित किया कि IgG, IgM और IgA एंटीबॉडी का एक साथ पता लगाना एक बेहतर नैदानिक ​​उपकरण प्रदान कर सकता है।