एंजाइम इंजीनियरिंग
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अमूर्त

यूवी-उत्परिवर्तन द्वारा प्रेरित बैसिलस एसपी द्वारा प्रोटीएज़ उत्पादन का मूल्यांकन और लक्षण वर्णन

नेहा कर्ण और संतोष कुमार कर्ण

 बेसिलस एसपी के फेनोटाइपिक म्यूटेंट को प्रोटीज गतिविधि को बढ़ाने की उनकी क्षमता का परीक्षण करने के लिए यूवी विकिरण द्वारा विकसित किया गया था। पांच म्यूटेंट में से, RS1 अन्य म्यूटेंट और जंगली-प्रकार के स्ट्रेन की तुलना में अधिक कुशल पाया गया। अधिकतम प्रोटीज बेसिलस एसपी RS1 स्ट्रेन के सेल एक्सट्रैक्ट से प्राप्त किया गया था, जिसका उपयोग शुद्धिकरण और लक्षण वर्णन के लिए किया गया था। बेसिलस एसपी RS1 से कल्चर फ़िल्ट्रेट को अमोनियम सल्फेट अवक्षेपण के साथ शुद्ध किया गया था; कल्चर फ़िल्टर किए गए सुपरनैटेंट ने उच्चतम विशिष्ट प्रोटीज गतिविधि दिखाई थी और इसमें कल्चर के कुल प्रोटीज प्रतिशत का 86% शामिल था। प्रोटीज को शुद्ध करने के लिए 40-70% के बीच अमोनियम सल्फेट अवक्षेपण का उपयोग किया गया था और इसके परिणामस्वरूप असंकेंद्रित सुपरनैटेंट की तुलना में विशिष्ट गतिविधि में 20 गुना वृद्धि हुई। स्तंभ शुद्धिकरण के परिणामस्वरूप बेसिलस एसपी RS1 के असंकेंद्रित सुपरनैटेंट की तुलना में विशिष्ट गतिविधि में 44 गुना वृद्धि हुई। प्राप्त परिणामों के आधार पर, उत्परिवर्ती स्ट्रेन RS1 को प्रोटीज एंजाइम के शुद्धिकरण के लिए सबसे उपयुक्त पाया गया। शुद्ध किए गए प्रोटीज एंजाइम की पीएच 7.0 पर फॉस्फेट बफर के साथ अधिकतम सक्रियता थी और इष्टतम ऊष्मायन समय 24 घंटे था। RS1 से अलग किया गया प्रोटीज पीएच 8.5 और तापमान 60 डिग्री सेल्सियस पर स्थिर है, इसके अलावा इस एंजाइम का व्यावसायिक रूप से दोहन किया जा सकता है।