क्लिनिकल और प्रायोगिक नेत्र विज्ञान जर्नल
खुला एक्सेस

अमूर्त

केराटोसाइट वंश के साथ मानव वसा-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं का विभेदन इन विट्रो

शिजिया झांग, लादन एस्पांडर, कैथलीन एमपी इम्होफ, और ब्रूस ए. बन्नेल

उद्देश्य: इन विट्रो में प्राथमिक केराटोसाइट्स के साथ सह-संस्कृति द्वारा केराटोसाइट वंश में मानव वसा-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (एचएएससी) के भेदभाव का मूल्यांकन करना ।
सामग्री और तरीके: केराटोसाइट अंतर माध्यम (केडीएम) में नीचे की तरफ एचएएससी और ऊपर केराटोसाइट्स विकसित करने के लिए ट्रांसवेल इन्सर्ट का उपयोग करने वाली सह-संस्कृति प्रणाली विकसित की गई थी। पूर्ण संवर्धन माध्यम (सीसीएम) और केडीएम में संवर्धित एचएएससी को नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। 16 दिनों के बाद, कोशिका गणना द्वारा एचएएससी की आकृति संबंधी परिवर्तनों और प्रसार के लिए जांच की गई। एल्डिहाइड डिहाइड्रोजनेज 3 परिवार, सदस्य A1 (ALDH3A1) और केराटोकेन की अभिव्यक्ति का पता लगाने के लिए qRT-PCR और फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग
किया गया qRT-PCR ने सांख्यिकीय रूप से गैर-महत्वपूर्ण p-मानों के बावजूद सह-संस्कृति प्रणाली में ALDH3A1 और केराटोकैन दोनों की अभिव्यक्ति में वृद्धि की ओर एक निश्चित प्रवृत्ति दिखाई। फ्लो साइटोमेट्री ने CCM समूह (p<0.001) और यहां तक ​​कि KDM समूह (ALDH3A1 के लिए p<0.001 और केराटोकैन के लिए p<0.01) के सापेक्ष सह-संस्कृति प्रणाली में ALDH3A1 और केराटोकैन के प्रोटीन स्तरों में उल्लेखनीय वृद्धि दिखाई।
निष्कर्ष: सह-संस्कृति विधि इन विवो अनुप्रयोगों से पहले स्टेम सेल आबादी के भेदभाव को प्रेरित करने के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण है। यह अध्ययन ऑटोलॉगस मल्टी-पोटेंशियल स्टेम सेल का उपयोग करके कॉर्नियल ऊतक की बायोइंजीनियरिंग के लिए एक महत्वपूर्ण क्षमता को प्रकट करता है।