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कोलन कैंसर SW480 कोशिकाओं के विरुद्ध पैरास्पोरिन 2Aa1 और इसके एनालॉग से प्राप्त पेप्टाइड्स की साइटोटॉक्सिक गतिविधि

जेनिफर क्रूज़

पैरास्पोरिन-2 (PS2Aa1) बैसिलस थुरिंजिएंसिस द्वारा निर्मित एक विष है और इसने कैंसर कोशिका रेखाओं जैसे: MOLT-4, जर्कट, सावानो और हेपजी2 के विरुद्ध उच्च साइटोटॉक्सिसिटी दिखाई है। तदनुसार, इसके साइटोटॉक्सिक प्रभाव को समझाने के लिए, एक बहु-चरण तंत्र मॉडल प्रस्तावित किया गया है: सबसे पहले, PS2Aa1 झिल्ली में GPI-लंगर रिसेप्टर्स या अन्य प्रोटीन से बंधेगा; फिर, केंद्रित विषाक्त पदार्थों को ऑलिगोमेराइज़ किया जाता है, उसके बाद, ट्रांसमेम्ब्रेन छिद्र बनते हैं, जो झिल्ली पारगम्यता (1) में क्षति उत्पन्न करते हैं। हालाँकि, इसकी क्रियाविधि को बिल्कुल भी स्पष्ट नहीं किया गया है। इसलिए, इस शोध कार्य में हमने Fmoc रणनीति द्वारा पेप्टाइड्स को संश्लेषित करते हुए PS2Aa1 का विखंडन किया। हमने PS2Aa1 के विभिन्न डोमेन से प्राप्त 3 पेप्टाइड्स प्राप्त किए जिन्हें P264-G274, Loop1-PS2Aa और Loop2-PS2Aa कहा जाता है। इसके अतिरिक्त, P264-G274 (P264-V268K, P264-V268W, और P264-V268H) के 3 व्युत्पन्न, Loop1-PS2Aa (Loop1-Y5K) के 1 व्युत्पन्न और Loop2-PS2Aa (Loop2-N4W) के 1 व्युत्पन्न प्राप्त किए गए। प्रत्येक अवशेष में परिवर्तन यौगिकों के आवेश और हाइड्रोफोबिसिटी में वृद्धि द्वारा समर्थित थे। पेप्टाइड्स की द्वितीयक संरचनाओं की पुष्टि सर्कुलर डाइक्रोइज़्म (DC) स्पेक्ट्रा द्वारा की गई थी। PS2Aa1 के सभी पेप्टाइड्स ने 190 एनएम पर अधिकतम अवशोषण बैंड और 205-220 एनएम के बीच दो न्यूनतम अवशोषण बैंड के साथ α-हेलिक्स की एक द्वितीयक संरचना प्रदर्शित की। इसके अलावा, मानव एरिथ्रोसाइट्स के हेमोलिसिस की डिग्री निर्धारित की गई थी, जिसमें दिखाया गया था कि मूल्यांकन किए गए सभी पेप्टाइड्स में HC ₅₀ 100 µM से कम था, सकारात्मक नियंत्रण (TX-100 0.1 %) की तुलना में 24% से कम हेमोलिसिस था। अंत में, पूरे पेप्टाइड्स ने SW480 के खिलाफ गतिविधि प्रदर्शित की ; यह दर्शाता है कि P264-V268K 5.716 μM के IC ₅₀ के साथ सबसे अधिक सक्रिय था । 5-फ्लूरोरासिल, कीमोथेरेपी दवा, को सकारात्मक नियंत्रण के रूप में लिया गया था। ये परिणाम स्पष्ट रूप से प्रदर्शित करते हैं कि P264-V268K में SW480 कोलन कैंसर कोशिकाओं के उपचार में एक सुरक्षित, चयनात्मक और संभवतः एक नई क्रियाविधि के साथ एक बड़ी क्षमता है।