ट्रांसक्रिप्टोमिक्स: ओपन एक्सेस
खुला एक्सेस

अमूर्त

एस्चेरिचिया कोली का उच्चारण और SAK-मेल्डेड मानव इंटरफेरॉन अल्फा का शुद्धिकरण

राज गायकवाड़

स्टैफिलोकिनेज (SAK) संयोजन प्रोटीन के रूप में समावेशन निकायों से ई. कोली से प्राप्त मानव इंटरफेरॉन - α (rhIFN α2b) के बेहतर रीफोल्डिंग और फ़िल्टरेशन के लिए एक रणनीति का वर्णन किया गया है। इस तरह के संयोजन प्रोटीन को उच्चारण के लिए असामान्य कोडन के पूरक की आवश्यकता नहीं थी और इसे 37oC पर स्थिर पाया गया। रीफोल्डिंग की आदर्श अवस्थाओं में किसी अन्य विशेषज्ञ की आवश्यकता के बिना एक हल्के डीनेचुरेटिंग ऑपरेटर का उपयोग शामिल था, जो कि समूहीकरण को रोकता है। SAKrhIFN α2b संयोजन प्रोटीन को सफाई के दो चरणों का उपयोग करके प्रभावी ढंग से फ़िल्टर किया गया था और एंटरोकिनेज का उपयोग करके दो भागों में विभाजित किया गया था, अर्थात् SAK और IFN। दोनों प्रोटीन को जैविक रूप से सक्रिय देखा गया, जो दोनों संयोजन सहयोगियों के उचित पतन को दर्शाता है। पृथक किए गए IFN ने RP-HPLC पर तुलनीय रखरखाव समय प्रदर्शित किया, क्योंकि बैक्टीरिया ने अनटैग किए गए फ़िल्टर किए गए IFN को निर्धारित किया और साथ ही एजिलेंट 2100 बायोएनालाइज़र पर तुलनीय उप-परमाणु भार भी दिखाया, जो एंटरोकिनेस क्लीवेज के बाद IFN की सही तैयारी को दर्शाता है। SAK-IFN के उच्चारण स्तर को तुलनात्मक खोजपूर्ण स्थितियों के तहत अनटैग किए गए IFN के साथ देखे गए स्तर से दो गुना अधिक देखा गया। इंटरफेरॉन (IFN) प्राकृतिक कोशिका-ध्वजांकित प्रोटीन हैं जो संक्रमण, परजीवी और ट्यूमर कोशिकाओं जैसी समस्याओं के आधार पर अधिकांश कशेरुकियों की सुरक्षित व्यवस्था की कोशिकाओं द्वारा निर्मित होते हैं। वे ग्लाइकोप्रोटीन के विशाल वर्ग से संबंधित हैं जो वायरल संक्रमण के एक प्रमुख मार्कर डबलस्ट्रैंडेड आरएनए की उपस्थिति के कारण कोशिकाओं की एक विस्तृत श्रृंखला द्वारा उत्पादित होते हैं। IFN की नैदानिक ​​क्षमता को मान्यता मिलने के बाद, FDA ने विशेष रूप से rhIFNα2a (रोफेरॉन ए) और IFNα2b (इंट्रोन ए) दवाओं को हानिकारक ट्यूमर और वायरल बीमारियों के उपचार के लिए अनुमोदित किया। इंटरफेरॉन उपचार का उपयोग (कीमोथेरेपी और विकिरण के साथ) कुछ बीमारियों, हेल्प्स से संबंधित कापोसी के सारकोमा और लगातार हेपेटाइटिस बी और सी (रेमिंगटन, 1995) के उपचार के रूप में किया जाता है।