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फ्लोरोसेंट लूप-हाइब्रिड मोबिलिटी शिफ्ट तकनीक का उपयोग करके मानव एण्ड्रोजन रिसेप्टर बहुरूपता का विश्लेषण

टोमोकाज़ु इशिकावा, शोइची मात्सुकुमा, मित्सुयो योशिहारा, तात्सुओ कुरोसावा और योहेई मियागी

मानव एण्ड्रोजन रिसेप्टर जीन के एक्सॉन 1 में पॉलीमॉर्फिक साइट्स के विश्लेषण के लिए एक फ्लोरोसेंट लूप-हाइब्रिड मोबिलिटी शिफ्ट (LH-MS) तकनीक शुरू की गई थी। (CAG)17-31 या (CTG)17-31 लूप को क्रमशः रिवर्स या फॉरवर्ड LH जांच के साथ संकरण के बाद PCR उत्पादों के सेंस- या एंटीसेंस स्ट्रैंड से बाहर निकलने के लिए माना जाता था। जब पुरुष डीएनए की एक सरणी का विश्लेषण Cy5-लेबल वाले LH जांच का उपयोग करके किया गया था, तो CAG दोहराव लंबाई और पॉलीएक्रिलामाइड जैल पर फ्लोरोसेंट LH बैंड की स्थिति के बीच एक अद्वितीय रैखिक सहसंबंध स्थापित किया गया था। इस रैखिक रूप से शिफ्टिंग बैंड पैटर्न का उपयोग CAG दोहराव लंबाई के LH सीढ़ी आकार मार्करों को इकट्ठा करने के लिए किया गया था। महिला डीएनए के विश्लेषण से पता चला कि 87% महिलाएं CAG दोहराव बहुरूपता के लिए विषम हैं, जो महिला कैंसर रोगियों में ट्यूमर के क्लोनलिटी विश्लेषण के लिए जानकारीपूर्ण हो सकती है। सिद्धांत के प्रमाण के रूप में, विषमयुग्मी मादा कोलोरेक्टल ट्यूमर डीएनए की जांच फ्लोरोसेंट एलएच-एमएस तकनीक से की गई और मिथाइलेशन-संवेदनशील प्रतिबंध एंजाइम एचपीए II के साथ उपचार के बाद एक एलील की हानि स्पष्ट रूप से प्रदर्शित की गई।