क्लिनिकल और प्रायोगिक नेत्र विज्ञान जर्नल
खुला एक्सेस

अमूर्त

आयु-संबंधित कॉर्टिकल मोतियाबिंद से लेंस ऊतक में ERCC6 जीन की परिवर्तित अभिव्यक्ति और डीएनए मिथाइलेशन प्रोफाइल

योंग वांग, गुओवेई झांग, फी ली, लिहुआ कांग, जिंदोंग बेन, हान रोंग और हुआजिन गुआन

पराबैंगनी (UV)-प्रेरित DNA क्षति आयु-संबंधी मोतियाबिंद (ARC) के रोगजनन के लिए जिम्मेदार है और इसे न्यूक्लियोटाइड एक्सिशन रिपेयर (NER) के माध्यम से ठीक किया जाता है। यह ज्ञात है कि ERCC6 द्वारा कोडित कॉकेन सिंड्रोम पूरक समूह B (CSB) प्रोटीन NER कॉम्प्लेक्स का एक घटक है। DNA मिथाइलेशन प्रमुख एपिजेनेटिक घटनाओं में से एक है और इसे DNA 5-साइटोसिन-मिथाइलट्रांसफेरेज़ (DNMTs) द्वारा उत्प्रेरित किया जाता है। इस अध्ययन का उद्देश्य लेंस के ऊतकों में ERCC6 प्रमोटर क्षेत्र में CpG द्वीपों के DNA मिथाइलेशन के ARC रोगजनन में संभावित योगदान की जांच करना था। इस अध्ययन में पंद्रह कॉर्टिकल प्रकार के ARC लेंस और मानव विषयों से पंद्रह पारदर्शी लेंस शामिल किए गए थे। लेंस में ERCC6 और DNMTs अभिव्यक्ति का विश्लेषण qRT-PCR और वेस्टर्न ब्लॉट द्वारा किया गया था। ERCC6 की मिथाइलेशन स्थिति का मूल्यांकन करने के लिए बिसल्फ़ाइट-सीक्वेंसिंग PCR (BSP) किया गया था। ERCC6 अभिव्यक्ति में DNA मेथिलिकरण की भूमिका की पुष्टि करने के लिए ह्यूमन लेन्स एपिथेलियम B-3 (HLE B-3) में एक डीमेथिलेटिंग एजेंट 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC) मिला कर एक इन-विट्रो प्रयोग किया गया। परिणाम दर्शाते हैं कि ARCs के LECs और लेन्स कॉर्टेक्स में ERCC6 के mRNA और प्रोटीन स्तर में उल्लेखनीय कमी आई थी। ARCs के LECs में DNMT3b mRNA नियंत्रण समूह की तुलना में उल्लेखनीय रूप से अधिक था। ARC समूह में, ERCC6 के प्रमोटर क्षेत्र में CpG द्वीप ने नियंत्रण समूह की तुलना में LECs में हाइपरमेथिलीकरण प्रदर्शित किया। 5-aza-dC से उपचार के बाद, HLE B-3 में ERCC6 प्रोटीन का स्तर बढ़ गया। ईआरसीसी6 जीन में यह एपिजेनेटिक परिवर्तन एआरसी गठन का एक कारक हो सकता है, जो खराब डीएनए मरम्मत से संबंधित है।