जर्नल ऑफ़ सेल साइंस एंड थेरेपी
खुला एक्सेस

अमूर्त

वयस्क माउस अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न बहुशक्तिशाली मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं के पृथक्करण, प्रसार, लक्षण-निर्धारण और विभेदन के लिए एक सरल विधि

Jitendra Kumar Chaudhary and Pramod C Rath

मेसेनकाइमल स्टेम सेल (MSCs) स्पिंडल के आकार के, आसंजक, क्लोनोजेनिक, गैर-भक्षणिक, फाइब्रोब्लास्टिक और स्व-नवीकरण और प्रसार की अंतर्निहित क्षमता के साथ प्रकृति में बहुशक्तिशाली होते हैं। प्रसार, स्व-नवीकरण और बहु-वंशीय भेदभाव की अंतर्निहित प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए अस्थि मज्जा MSCs का सबसे समृद्ध स्रोत है। माउस अस्थि मज्जा से मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं के पृथक्करण, प्रसार, लक्षण वर्णन और भेदभाव की विधि को बेहतर बनाने के लिए कई अध्ययन किए गए हैं, लेकिन कोई भी व्यापक रूप से स्वीकार्य नहीं है। MSCs संस्कृति की सार्वभौमिक रूप से स्वीकार्य विधि की अनुपलब्धता के कारण इस दिशा में निरंतर प्रयास किए जा रहे हैं। यहाँ, हम कुछ सूक्ष्म संशोधनों के साथ एक सरल विधि की रिपोर्ट करते हैं जिसका उद्देश्य इन विट्रो में MSCs के पृथक्करण, संवर्धन, प्रसार और भेदभाव की समग्र विधि में सुधार करना है। इस प्रोटोकॉल का पालन करते हुए, हमने स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा दिखाए गए विशिष्ट स्पिंडल के आकार की आकृति विज्ञान के साथ MSCs को अलग किया है। इन कोशिकाओं में MSC-विशिष्ट मार्करों, CD29 (98.94% ± 0.67%), CD44 (84.27% ± 7.77%), Sca-1 (92.70% ± 3.81%) की अभिव्यक्ति भी देखी गई, जबकि HSC-विशिष्ट मार्करों जैसे CD45 (0.40% ± 0.10%), CD34 (0.15% ± 0.05%) और CD11b (0.45% ± 0.15%) की नगण्य अभिव्यक्ति देखी गई। MSCs को एडीपोसाइट्स, ऑस्टियोसाइट्स और चोंड्रोसाइट्स जैसे मेसोडर्मल वंशों के साथ-साथ एक्टोडर्मल न्यूरॉन जैसी कोशिकाओं में भी विभेदित पाया गया। इसके अलावा, MSCs ने Oct4, Nanog, Sox2 और Myc जैसे प्लुरिपोटेंसी-संबंधित प्रतिलेखन कारकों की विभेदक मूल अभिव्यक्ति दिखाई। उपरोक्त निष्कर्षों के आधार पर, हम एक सरल प्रोटोकॉल का प्रस्ताव करते हैं जिसका प्रयोग प्रयोगात्मक और अनुप्रयोग उद्देश्यों के लिए माउस अस्थि मज्जा से बहुशक्तिशाली MSCs को अलग करने, संवर्धन, प्रसार और लक्षण-निर्धारण के लिए किया जा सकता है।