एंटीवायरल और एंटीरेट्रोवाइरल जर्नल
खुला एक्सेस

अमूर्त

एचबीवी पॉलीमरेज़ में नवीन आरटीएम204 उत्परिवर्तन एडेफोविर और टेनोफोविर के प्रति संवेदनशीलता को कम करता है

के झांग, क्रिश्चियन बाख, मारिया न्यूमैन-फ्राउने, युचेन ज़िया, बास्टियन बेगेल, रॉल्फ कैसर, वेरेना शिल्डगेन, एंड्रिया क्रेमर, ओलिवर शिल्डजेन और उलरिके प्रोट्ज़र

पृष्ठभूमि: जीर्ण HBV-संक्रमण का उपचार प्रतिरोध के चयन द्वारा सीमित है। HBV रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस के YMDD रूपांकन में rtM204I/V उत्परिवर्तन लैमिवुडिन और एन्टेकाविर के विरुद्ध प्रतिरोध निर्धारक हैं, लेकिन एडेफोविर या टेनोफोविर के विरुद्ध नहीं। बाद की दो दवाओं के लिए सीमित व्यवस्थित फेनोटाइपिक डेटा उपलब्ध हैं।

विधियाँ: rtM204 उत्परिवर्तन (rtM204A/I/K/L/Q/S/T/V) को CMV प्रमोटर के नियंत्रण में प्रतिकृति-सक्षम 1.1-गुना HBV-ओवरलेंथ निर्माणों में व्यवस्थित रूप से पेश किया गया। वायरल प्रतिकृति फिटनेस को सामान्यीकृत क्षणिक संक्रमण के बाद चयनात्मक qPCR द्वारा निर्धारित किया गया था। मानकीकृत उच्च-थ्रूपुट फेनोटाइपिक परख का उपयोग करके लैमिविडून, एंटेकावीर, एडेफोविर और टेनोफोविर के IC50 मानों को निर्धारित करके इन विट्रो दवा संवेदनशीलता का मूल्यांकन किया गया। हेपाआरजी कोशिकाओं के संक्रमण द्वारा संक्रामकता का विश्लेषण किया गया।

परिणाम: इन विट्रो फेनोटाइपिंग से पता चला कि rtM204K ने एडेफोविर और टेनोफोविर के लिए उच्च-स्तर का प्रतिरोध प्रदान किया, लेकिन साथ ही प्रतिकृति क्षमता को भी कम किया। rtM204I/V के लिए वर्णित rtL180M या rtL80I द्वारा इसकी उपयुक्तता को बहाल नहीं किया जा सका। rtM204L और rtM204Q ने प्रतिकृति क्षमता की हानि के बिना एडेफोविर/टेनोफोविर के लिए कम-स्तर की कम संवेदनशीलता प्रदान की। rtM204A/I/S/T ने किसी भी दवा के प्रति संवेदनशीलता को काफी हद तक कम कर दिया। दिलचस्प बात यह है कि एकल उत्परिवर्तन rtM204V ने दोनों दवाओं के प्रति संवेदनशीलता को काफी कम कर दिया, लेकिन प्रतिपूरक उत्परिवर्तन rtL180M के साथ संयोजन में प्रतिरोध खो दिया। ओवरलैपिंग S-जीन को प्रभावित करके, rtM204L को छोड़कर rtM204 म्यूटेंट ने हेपाआरजी कोशिकाओं में कम या कम संक्रामकता दिखाई।

निष्कर्ष: हमने समय और लागत प्रभावी फेनोटाइपिक परख की स्थापना की है और इन विट्रो में एडेफोविर और टेनोफोविर के लिए क्रॉस प्रतिरोध प्रदान करने वाले नए rtM204 उत्परिवर्तन की पहचान की है। वायरल आबादी में उनकी कम आवृत्ति के बावजूद, प्रतिपूरक उत्परिवर्तन के संभावित चयन के कारण उनके नैदानिक ​​महत्व को कम करके नहीं आंका जाना चाहिए, जो वायरल फिटनेस को बहाल कर सकता है।